肝S9與CYP450的區(qū)別,還真是不太清楚
更新時間:2021-01-14 點(diǎn)擊次數(shù):5673
肝S9是肝組織勻漿經(jīng)過9000g離心后的上清部分,簡稱為S9。S9是完整肝細(xì)胞去除細(xì)胞核、線粒體及大的碎片之后的部分,原則上保留了定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的微粒體蛋白,溶解在細(xì)胞漿液中的蛋白,以及各種細(xì)胞內(nèi)容物質(zhì),如NADPH、UDPGA、PAPS等啟動藥物代謝反應(yīng)的輔助因子。S9可以擴(kuò)展微粒體研究的范圍,但是引起所含有的輔助因子(也稱輔酶)量少,實驗時還是需要添加這些因子,以便實驗順利開展。肝細(xì)胞S9是肝實質(zhì)細(xì)胞勻漿液的去線粒體上清液,包含了大量的CYPs等藥物代謝酶,對于研究化合物的藥物代謝和考察潛在的藥物藥物相互作用是非常有用的研究工具,同時也是食品、化妝品、化學(xué)品等致突變試驗重要試劑。
從純度級別上來說,CYP450是同工酶系,是一類酶的總稱,也就是蛋白級別的物質(zhì)。肝微粒是亞細(xì)胞結(jié)構(gòu),不光有CYP450,還有一些別的蛋白或者膜機(jī)構(gòu)物質(zhì),S9的話,經(jīng)過普通的離心就獲得了,其成分較前兩個來說,更為復(fù)雜,所以說單一研究藥物代謝的情況的時候,自然是成分越清楚越好分析,所以大家更傾向于用微粒體和CYP450來做實驗了。
肝微粒體可以自己提取的,出去線粒體細(xì)胞器及細(xì)胞膜的破碎等,需要高速離心,也有鈣沉淀法。肝S9是組織除去線粒體上清液后,低俗離心機(jī)就可以做到了。
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