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IPHASE 七大種屬PBMC八折*!

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外周血單個核細(xì)胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC),是指外周血中具有單個核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞(Lymphocyte)、單核細(xì)胞(Monocyte)、樹突狀細(xì)胞(DC)和其他少量細(xì)胞。


01

原理

單個核細(xì)胞的體積、形態(tài)和比重與外周血其它細(xì)胞不同,紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞的比重超過1.080,單個核細(xì)胞的比重為1.070左右,血小板為1.030左右。因此,可利用各種血細(xì)胞和單個核細(xì)胞比重之間的差異將各種血細(xì)胞與單個核細(xì)胞分離開來。

Ficoll密度梯度離心法是分離、純化PBMC的方法。Ficoll是蔗糖的多聚體,中性,平均分子量400000,當(dāng)密度為1.2g/mL,未超出正常生理性滲透壓,也不穿過生物膜,故常用作PBMC分離的分離液。紅細(xì)胞、粒細(xì)胞比重大,離心后沉于管底;淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的比重小于或等于分離液比重,離心后漂浮于分離液的液面上,也可有少部分細(xì)胞懸浮在分離液中。吸取分層液液面上的白膜層細(xì)胞,并進行適當(dāng)?shù)那逑矗涂蓮耐庵苎蟹蛛x到較高純度的單個核細(xì)胞,即PBMC。




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